• <strong id="megsi"></strong>
  • <small id="megsi"><blockquote id="megsi"></blockquote></small>
  • <blockquote id="megsi"></blockquote>
    • 病毒RNA提取实验
    •  

      病毒RNA提取实验


      病毒RNA提取可以:(1)用于RNA病毒复制机制研究;(2)用于反向遗传学研究;(3)用于分子病毒学其他研究。

      详细

      实验方法

      实验方法
      • TE-饱和酚/氯仿提取法

      实验方法原理大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 
      实验材料
      试剂、试剂盒
      仪器、耗材
      抗体
      实验步骤
      一、实验材料准备

      1.  材料
       
      提纯TMV病毒液(10 mg/ml)。
       
      2.  设备
       
      冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。
       
      3.  试剂
       
      TE-饱和酚:氯仿(1:1),氯仿,3 M NaAc(pH5.2),乙醇(100%和70%),TE缓冲液,无RNA 酶的双菌水。
       
      二、操作步骤
       
      1.  取一eppendorf管加入提纯TMV(10 mg/ml)400 ml,再加入等体积酚/氯仿,盖紧管盖后用手充分振荡1分钟,4℃下12 000 g离心10分钟。
       
      2.  吸取水相于一新eppendorf管,再用酚/氯仿抽提,直至水相和有机相交界面无蛋白为止。
       
      3.  吸取水相于新eppendorf心管,加入等体积氯仿,用手倒置离心管数十秒,4℃下12 000 g离心10分钟。
       
      4.  取水相,加入1/10倍体积的3 mol/L NaAc(pH5.2),2.5倍体积的冰冷乙醇,混匀,-20℃30分钟。
       
      5.  4℃下12 000 g离心15分钟,小心弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀,4℃下12 000 g离心5分钟。
       
      6.  小心弃去上清液,沉淀真空干燥5分钟或空气干燥10分钟,并溶于无RNA 酶的双菌水或TE缓冲液中。
       
      7.  取10 ml进行电泳分析。
       
      展开 
      注意事项
      1.  整个操作应尽可能在低温下进行。
       
      2.  由于病毒RNA 镶嵌于外壳蛋白里面,因此要充分剥去病毒外壳蛋白,一般需要多次进行酚/氯仿的抽提。

       

      上海金畔生物科技有限公司

      地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室

      邮 编: 201208 

      固话总机:

      订货热线:15221999938

      24小时短信服务:15221999938

      服务投诉:15221999938

      网 址: www.kendier-tz.com

      Email:sales@jinpanbio.com

       

    • 上一篇:无
    • 下一篇:FastPrep 快速核酸提取仪
    蓬莱市| 福海县| 泸水县| 新野县| 柘荣县| 伊春市| 五华县| 朔州市| 林芝县| 松溪县| 宁晋县| 平谷区| 湄潭县| 西乌珠穆沁旗| 尼玛县| 德州市| 平昌县| 淳安县| 丰城市| 黄梅县| 广州市| 双桥区| 兴隆县| 新化县| 唐山市| 成安县| 丰宁| 磐安县| 兴和县| 哈尔滨市| 上蔡县| 辽阳县| 大竹县| 潼关县| 开江县| 吉隆县| 普格县| 钟祥市| 新龙县| 慈溪市| 芦山县| http://www.123.com http://www.123.com http://www.124.com 网页右侧悬浮深蓝色qq在线客服代码
    展开
    蓬莱市| 福海县| 泸水县| 新野县| 柘荣县| 伊春市| 五华县| 朔州市| 林芝县| 松溪县| 宁晋县| 平谷区| 湄潭县| 西乌珠穆沁旗| 尼玛县| 德州市| 平昌县| 淳安县| 丰城市| 黄梅县| 广州市| 双桥区| 兴隆县| 新化县| 唐山市| 成安县| 丰宁| 磐安县| 兴和县| 哈尔滨市| 上蔡县| 辽阳县| 大竹县| 潼关县| 开江县| 吉隆县| 普格县| 钟祥市| 新龙县| 慈溪市| 芦山县| http://www.123.com http://www.123.com http://www.124.com